神经细胞培养箱:神经细胞体外培养进展

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本文目录一览:

细胞培养步骤

1、细胞复苏 将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10mlDMEM培养基清洗,弃上清液。

2、将细胞转移到一15ml Falcon管中;加入5ml ES培养基(用培养基冲洗冻存管);离心3分钟;弃上清,用2ml ES培养基重悬细胞,至少吹打10次;接种在明胶包被(见下文)的6孔或6cm组织培养皿;孵育。

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3、取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。将材料剪碎,并用胰蛋白酶(或用胶原蛋白酶)处理(消化),形成分散的单个细胞,将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。

原代细胞培养常见问题有哪些

1、胰酶消化的程度是细胞培养中的一个关键步骤:消化过度细胞碎片增多,黑渣子增多,细胞会成片脱落,严重影响细胞活性,并有部分细胞漂浮,随弃去的胰酶流失;消化不足则细胞难于从瓶壁上吹下,反复吹打同样也会损伤细胞活性。

2、严格进行无菌操作,防止细菌霉菌、支原体污染,避免化学物质污染。吸取液体前,瓶口和吸管进行火焰消毒;吸取液体时,避免瓶口和吸管碰撞。离心管入台前,管口、管壁应消毒。

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3、原代培养的分离细胞在初次接触体外环境时,虽然被分散成单个细胞,但它们之间的互相影响还是存在的,而且这种影响对细胞能否存活是非常重要的。在这些细胞之间能产生一些促生长的活性物质,使细胞彼此互相促进存活和生长。

求助比较好的体外的神经细胞培养模型

模拟一个神经元最简单的方法就是伸出你的手,然后伸展你的手指。在这个模型中,你的手指就是树突,你的手掌就是细胞体,而你的胳膊就是轴突。你也可以用不同颜色的通条来制作神经元模型。

OGD模型即糖氧剥夺(OGD)离体脑缺血模型糖氧剥夺(Oxygen and glucose deprivation,OGD)模型:此法可模拟在体脑缺血模型,又称离体缺血模型。

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.取出生后1-3天内的大鼠脑组织后,先仔细剥除脑膜和血管等纤维成分,置入Hanks液中漂洗1~2次后,置于30~50倍的Hanks液中,脑组织比较柔软,反复吹打即可制成细胞悬液。

96孔板每个孔铺多少细胞

太多。96孔板每孔的面积小,每孔可容纳100至1000个细胞。30000个细胞铺在96孔板中,细胞数量多,会导致细胞过度拥挤,影响细胞的生长和增殖。

到2万每个孔。对于96孔板,RAW细胞的推荐种植密度为1到2万每个孔。这个密度是根据细胞的生长特性和96孔板的大小和形状等因素综合考虑得出的。

培养板容量:24孔板每孔容量约为5毫升,而96孔板每孔容量约为0.2毫升,由于培养液体积的不同,24孔板在细胞增殖过程中需要更换培养液的次数比96孔板少。

根据细胞生长的速度来决定,96孔板的每孔体积100~200ul,种细胞数一般都是2000~10000个/孔,最好不要超过10000个/孔。 同理,24孔板每孔大约500ul,那么细胞数一万为佳。

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标签: 细胞 培养基 神经细胞

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